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人 iPS细胞基因编辑和单细胞克隆系统

简要描述:产物名称:人 iPS细胞基因编辑和单细胞克隆系统
产物货号:CellArtis Y30021
产物品牌:TAKARA/ CellArtis
英文名称:Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit
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  • 产物型号:Y30021
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2023-11-15
  • 访&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;问&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;量:712
详细介绍
品牌其他品牌货号Y30021
供货周期现货应用领域医疗卫生,生物产业,综合

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产物名称:人 iPS细胞基因编辑和单细胞克隆系统

产物货号:CellArtis Y30021

产物品牌:TAKARA/ CellArtis

英文名称:Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit

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从开始到结束:人颈笔厂细胞基因编辑和单细胞克隆系统

人诱导多能干细胞(Human induced pluripotent stem cells,hiPSCs)是一个功能强大的研究工具和疾病模型,因为其具备增殖、自我更新、分化为多种细胞类型的能力。此外,人iPS细胞还可以再现细胞来源个体的疾病表型和基因型。将人iPS细胞结合基于CRISPR/Cas9的基因编辑技术,可以在同基因的细胞系中研究特定基因改变引起的功能影响,因为基因编辑过的人iPS细胞能提供可再生的、无遗传变异的患病细胞和健康细胞资源。

CRISPR/Cas9系统已经成为一个强大的基因编辑工具,因为其高的靶向特异性,编辑效率和易用性。该技术的强大主要源于它的简单,因为全部只需要一个Cas9核酸酶结合一个单链向导RNA(single guide RNA,sgRNA) 就可以决定靶向特异性(Jinek et al. 2012)。这种RNA编程的(RNA-programmable)方法利用了非同源末端连接(non-homologous end joining,NHEJ) DNA修复途径的易错特性,进而产生基因敲除(通过插入/删除)。这种方法也可以通过同源重组(homology-directed repair,HDR)途径被用于基因敲入。

CRISPR/Cas9系统的组件可以通过多种方法成功导入至靶细胞,包括基于载体的表达系统,RNA转染, 导入Cas9/sgRNA核糖核蛋白(ribonucleoprotein,RNP)复合物(Sander and Joung 2014)等。与基于载体的方法相比,直接导入Cas9/sgRNA RNPs提供了一种快速转入基因编辑实验的方法,同时脱靶效应的可能性更小(Kim et al. 2014)。

一旦Cas9/sgRNA RNP复合物被导入,为了分离和筛选感兴趣的基因型,单细胞必须被分离并扩增为克隆细胞系。传统上,从基因编辑的hiPS细胞建立一个克隆群是低效的、具有挑战性的和耗时的,因为hiPS 细胞是以集落生长和传代的。通常,这会导致细胞死亡和提前分化。然而,Cellartis单细胞克隆系统包含一个成分确定的培养系统(由基础培养基,包被剂,和添加剂组成),用于有效形成单细胞克隆和扩增基因编辑后的hiPSC克隆。DEF-CS culture system (Asplund et al. 2016)是一个基于单层培养的系统,规避了集落状培养带来的挑战,允许单细胞传代和促进接种的单细胞存活和后续扩增。

Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS Culture Media Kit (Code No. Y30021) 是一个完整的,在无饲养层和成分确定条件下,用于hiPSCs有效扩增和扩大生产的系统。试剂盒包含了从接种单细胞至96孔板到扩增至48孔板过程中所有必要的试剂。单细胞克隆扩增后,hiPSCs可以使用Cellartis DEF-CS 500 Culture System (Code No. Y30010)继续培养。


产物特点:

1.成分确定的,无血清,无饲养层培养

2.All-In-One型: 培养基+添加剂+包被剂维持良好的多能性状态,背景分化低

3.细胞非集落状均匀生长,轻松单细胞传代

4.单个干细胞基因操作实验的理想选择


产物名称:人 iPS细胞基因编辑和单细胞克隆系统

产物货号:CellArtis Y30021

产物品牌:TAKARA/ CellArtis

英文名称:Cellartis iPSC Single-Cell Cloning DEF-CS™ Culture Media Kit

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